肉的宰后嫩化核心归因于肌原玻纤节构的被破坏，肌原玻纤节构是由内源性核蛋清淀粉水解不良反应酶分解肌原玻纤和細胞骨架核蛋清构成的。与一百多年来一致是私信原点的钙核蛋清酶不一，胱天核蛋清酶（caspases）较近为喜欢英语爱好语句题。胱天核蛋清酶在細胞凋亡的执行工作时段起着至关首要的力，但其中caspase-3在人死之后核蛋清淀粉水解不良反应中的力是各上和复杂的的，因而值不值得进的一步探析。S-亚硝基化使用改善钙移除、电能代谢转化、核蛋清质分解和細胞凋亡来改善口感，分为嫩度和持水力。先前探析发展S-亚硝基化能够 变动依懒线粒体的caspase-3级联不良反应，这或者是相关肌肉細胞凋亡和鸡肉质量变的的原因。caspase-3的探析重点是是其与細胞凋亡的联系，因此，比较少有探析浅议S-亚硝基化改善caspase-3的系统。

2024年9月由扬州渔业大学专业张万刚专家团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物制品为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文题头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊论文：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年会影响成分：5.7

提出准确时间：2024年9月

投资者的单位：南京农业大学

科学研究原料：蛋白

拜谱作为技术设备：亚硝基化修饰组学

技術自驾路线：

一、学习数据

01.Caspase-3抗逆性

近几年尚不清NO对caspase-3的限设计用是否是归因于NO介导的S-亚硝基化，各不相同氨水浓度均值的GSNO最为外源性NO供应信息，以促进caspase-3的休外S-亚硝基化。然而反映，与没GSNO的组相比较，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力同质性调低（图1），与事先了解相同。GSNO处置调低caspase-3活力的不确定性因素仍有待于体现了。

图1 各不相同盐浓度的GSNO治理 对caspase-3生物的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化程度上

学习Caspase-3的亚硝基化度，以阐释GSNO对Caspase-3的化学反应性。经GSNO加工处理后，探测到caspase-3蛋清S-亚硝基化层面延长（图2）。这部分结局证明，外源性GSNO的培养可获得成功成脂caspase-3的身体外S-亚硝基化。另人大吃一惊的是，在找不到GSNO来源于的照表组中探测到一些不大的S-亚硝基化带，这证明caspase-3已经的发生内源性的S-亚硝基化。还有，本学习中caspase-3的S-亚硝基化度较高，而caspase-3的化学活化大幅度降低，这与已经的学习同步。以至于，caspase-3的特男人S-亚硝基化突显位点尚不知道，还是需要继续骤的挑战。

图2 GSNO解决对caspase-3S-亚硝基化平行的印象

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化突显组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。暗蓝色标识的字段觉得S-亚硝基化肽，橘红色标识的C觉得S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3溶解结蛋白质

结血清为另一种比较根本的体细胞核骨架血清，在保护肌体细胞核构造的构造完善版详细性和缩小性各方面起着比较根本效果，探索S-亚硝基化caspase-3对结血清挥发的太敏物质性具备比较根本重大意义。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的开始肌植物玻璃纤维血清）组相较于，0 μM GSNO组（肌原植物玻璃纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善版详细结血清含锌量明显的减低，显示caspase-3对结血清具备未知的血清水解反应实力。在GSNO孵育后，完善版详细结血清的含锌量明显的增强（P < 0.05）。与此同时，当GSNO氧浓度增大时，完善版详细结血清的含锌量定期调整（P < 0.05）（图5）。这一项发现了取决于，SNO修饰语的caspase-3以层次忽略的方试遏制结血清的挥发。

图5.S-亚硝基化caspase-3可降解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3光降解肌钙核蛋白-T

肌钙淀粉酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶的调高有担当力量拉伸的细细的的所需肌原弹性黏胶纤维素淀粉酶。TnT的挥发基本特征是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化先决条件下，caspase-3对TnT的挥发状态如下图6如下，与Std组（因为不能含caspase-3和GSNO的肌原弹性黏胶纤维素）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写更为很大上升，显示caspase-3参与活动了TnT的挥发，前者，caspase-3与GSNO的孵育导至30 kDa TnT避免。在100和200 μM GSNO组之間不能检验到很大的对比分析(P > 0.05)，而当GSNO的溶度超过400 μM 时，该细节描写更为很大避免(P < 0.05)。这一些发现显示了SNO装饰的caspase-3对TnT挥发的不错抑定制用。结淀粉酶和TnT是caspase-3的神经敏感底物，而GSNO清理调低caspase-3的活力很有可能导至肌原弹性黏胶纤维素淀粉酶挥发层度调低。综合上面的所写，NO诱导型的S-亚硝基化不错顺利通过装饰半胱氨酸残基来的调高caspase-3的活力，为了进一次的会影响其对结淀粉酶和TnT的淀粉酶淀粉水解水平，为了的会影响羊肉茶叶品质。

图6. S-亚硝基化caspase- 3吸附肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本探究主要是刍议S-亚硝基化对caspase-3体现的影晌试述自后对鸡肉肌原化学弹性纤维休外生物降解的影晌。蛋白质酶酶S-亚硝基化能能体现caspase-3的半胱氨酸残基，才能会造成caspase-3活力性降低，进几步能够抑制了其对鸡肉肌原化学弹性纤维蛋白质酶酶的蛋白质酶酶蛋白质水解业务能力。

三、拜谱个人心得体会

概述运用了酶活测定法，亚硝基化突显组学概述，WB等测量途径，察觉球球膳食纤维质S-亚硝基化能突显caspase-3的半胱氨酸残基，这产生了caspase-3活性酶类的削减，齐头并进一点调节了其对鸡肉肌原纤维棉球球膳食纤维质的球球膳食纤维质溶解性能。本概述为解读球球膳食纤维质质亚硝基化对肉肥的改善制度提供数据一个多个新的第一人称视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球营养物质组学、呈现球营养物质组学、新陈代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸物料系列物料，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total脱色回归、存在巯基，欢迎大家咨询！

参考使用论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663