冷胁迫是损害农大田作物收获量的重要条件试炼最为。钙根据性淀粉酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）无线信号推送到血细胞并重置对挫折回复的主要可以调节要素，但其房产调控系统尚不模糊不清。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷过酸掩盖位点查测服务。

英语名称：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文字幕版头：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

客人基层单位：浙江大学

分析用料：番茄

拜谱提高工艺：磷过酸修饰语位点论文检测

科学研究思绪：

一、深入分析报告单

1、CPK27在底温胁迫下表达方法上涨，关键在于减弱茎叶耐热性

自始科研得知，CPK27在冷胁迫前提条件下抒发爱上浮。为效验相应结论，这篇文章中作著食用CPK27的两位敲除突变性系（cpk27 #2，#6）参与耐热性考试，得知CPK27的转录水准取得远超剖析组（图1a-b）。在CPK27抒发爱被变弱的草本花卉中，对耐热性的资料的功效取得变弱。进一部的亚组织浅析与促活科研得知，冷胁迫提高CPK27向组织核沉淀，并资料其磷酸性反应水准（图1 f）。免疫抗体印记浅析进一部证明冷胁迫诱导型 CPK27 在核内淀粉酶丰度曾加、胞内丰度避免，外源CaCl₂净化处理可有些回到cpk27的冷强烈表型，得知CPK27依靠Ca²⁺卫星信号引领的功效。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺根据习惯增加番茄耐寒性性

2、CPK27凭借调节作用黄吩噻嗪自动合成途经减缓高低温损害

转录组测序数据报错，CPK27的过展示重要上浮黄大环内酯生态学镶嵌相关DNA，如CHS、CHI和FLS等，时候黄大环内酯分解环路重要含有。而CPK27甲基化体中这一些DNA展示再降，报错CPK27利用增进黄大环内酯镶嵌有助于主茎舒缓高低温胁迫分享的防氧化阻力（图2a-e）。

图2 RNA-seq进行分析CPK27调整的冷没有响应基因组

3、HY5是CPK27介导的抗寒讯号径路中的核心靶标

为验正 CPK27 与 HY5 的共同意义，写作者率先实现了酒曲双有性杂交（Y2H）进行试验，结局证明这俩者有着共同意义（图3a）。双团伙荧光主动依存（BiFC）进行试验进十步证明CPK27 与 HY5 在上皮细胞结构内突发共同意义（图 3b）。接着随后利用免疫力共积淀等技术设备，会发现HY5与CPK27在沉水植物休内有着共同意义，且这俩者的共同意义存在钙阴阳离子（Ca²⁺）忽略性（图 3c）。前者，在Co-IP进行试验的球蛋白添加前释放冷胁迫解决，结局表现冷胁迫可强化HY5与CPK27的共同意义（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷碱化其关健位点

4、CPK27磷过酸HY5推进其转录活性酶类，推进黄大环内酯dna展示

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用修饰语位点测试，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并提升其平衡性

5、CPK27 在类黄酮生态学生成信号通路中意义于HY5的中上游

总合基因组抒发和分解代谢物分享没想到（图5），CPK27在冷胁迫运行期间中目的于HY5的中上游，依据房产调控 HY5 介导的类黄酮生物体转化成通道影响力草本植物耐旱性。

图5 CPK27用处于HY5上中下游

二、文章标题总结ppt

与此同时上述，这段话科学钻研揭示CPK27磷碱化呈现HY5蛋白质，激活卡类黄酮制作而成路径，有助于抗腐蚀产品积少成多，转而不断增强耐寒性的能力。该科学钻研确立了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节工作机制（图6），得知CPK27介导的HY5磷碱化是接连钙数字信号与次生分解防御力的关键性部分，为认识树种磨难回复手机网络提供数据了新视距。

图6 CPK27-HY5模块电源提高了花草承受冷胁迫的长效机制

三、拜谱总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、装饰血清质组学、分解组学、转录组学等两组学设备技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参阅论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134